Evaluación y uso de un péptido sintético para la detección de anticuerpos específicos contra Plasmodium falciparum
Artículo barra lateral
PDF
FLIP
XML
Contenido principal del artículo
Autores
Resumen
Introducción. La malaria continúa siendo una de las enfermedades que causa mayor morbimortalidad a nivel mundial. Por esta razón es importante desarrollar herramientas diagnósticas eficaces que se implementen como estrategias para el control de la enfermedad. Objetivos. Estandarizar las condiciones del inmunoensayo enzimático (ELISA), para la detección de IgG específica contra Plasmodium falciparum en sueros de pacientes diagnosticados por gota gruesa con malaria no complicada por P. falciparum, empleando como antígeno un extracto proteico obtenido a partir de cultivo de P. falciparum o un péptido sintético derivado de la proteína de superficie de merozoito GLURP (del inglés: glutamate rich protein). Materiales y métodos. Para la estandarización de la técnica, se utilizaron 22 sueros de pacientes positivos para malaria por P. falciparum y 11 diagnosticados positivos para malaria por P. vivax utilizando la técnica de gota gruesa. Como controles negativos se utilizaron 44 sueros de individuos sanos. Los sueros fueron probados contra extracto de proteínas del parásito y el péptido sintético IMT 94 derivado de la proteína GLURP, para evaluar las concentraciones y las diluciones óptimas de cada componente del sistema. Para la validación de la técnica se utilizaron 251 sueros de pacientes positivos para P. falciparum y 44 sueros de individuos sanos, diagnosticados utilizando la técnica de gota gruesa. Resultados. La técnica estandarizada con el péptido sintético permitió observar diferencia significativa en el reconocimiento de sueros de pacientes, controles positivos y negativos por los antígenos (extracto de proteínas y péptidos sintéticos). Conclusiones. La metodología usada permite identificar la respuestas inmune específica contra P. falciparum.
Palabras clave:
Detalles del artículo
Licencia
NOVA por http://www.unicolmayor.edu.co/publicaciones/index.php/nova se distribuye bajo una Licencia Creative Commons Atribución-NoComercial-SinDerivar 4.0 Internacional.
Así mismo, los autores mantienen sus derechos de propiedad intelectual sobre los artículos.
Referencias
2. WHO, World malaria report 2017. World Health Organization, Geneva, Licence: CC BY-NC-SA 3.0 IGO., 2017.
3. Cerutti, C., Jr., et al., Epidemiologic aspects of the malaria transmission cycle in an area of very low incidence in Brazil. Malar J, 2007. 6: p. 33.
4. van Gool, T., et al., A simple and fast method to exclude high Plasmodium falciparum parasitaemia in travellers with imported malaria. Malar J, 2011. 10: p. 300.
5. Caballero, M.L., Inmunología de la infección por helmintos. Rev. Esp. Alergol Inmunol Clín., 1998. 13(6): p. 297-313.
6. Schroeder, H.W., Jr. and L. Cavacini, Structure and function of immunoglobulins. J Allergy Clin Immunol, 2010. 125(2 Suppl 2): p. S41-52.
7. Maestre, A., E. Arango, and J. Carmona-Fonseca, Status of allele frequency and diversity of Plasmodium falciparum msp1, msp2 and glurp before implementation of an artemisinin-based combined therapy in Northwestern Colombia. Colomb Med (Cali), 2013. 44(4): p. 208-12.
8. Barrera, S.M., et al., (Genotypic survey of Plasmodium falciparum based on the msp1, msp2 and glurp genes by multiplex PCR). Biomedica, 2010. 30(4): p. 530-8.
9. Amoah, L.E., et al., Natural antibody responses to Plasmodium falciparum MSP3 and GLURP(R0) antigens are associated with low parasite densities in malaria patients living in the Central Region of Ghana. Parasit Vectors, 2017. 10(1): p. 395.
10. Espinal Carlos, et al., Aislamiento y caracterización de cepas colombianas de Plasmodium falciparum. Biomédica, 1982. 2(3): p. 118-128.
11. Trager, W. and J.B. Jensen, Human malaria parasites in continuous culture. Science, 1976. 193(4254): p. 673-5.
12. Rojas, M.O. and M. Wasserman, Supersincronizacion del crecimiento in vitro del Plasmodium falciparum / Synchronization of in vitro growth of Plasmodium falciparum. Biomedica, 1987. 7(3/4): p. 75-80.
13. Heiber A and S. T., Preparation of Parasite Protein Extracts and Western Blot Analysis. Bio-protocol, 2014. 4(11).
14. Borre, M.B., et al., Primary structure and localization of a conserved immunogenic Plasmodium falciparum glutamate rich protein (GLURP) expressed in both the preerythrocytic and erythrocytic stages of the vertebrate life cycle. Mol Biochem Parasitol, 1991. 49(1): p. 119-31.
15. Noya, O., et al., Immunodiagnosis of parasitic diseases with synthetic peptides. Curr Protein Pept Sci, 2003. 4(4): p. 299-308.
16. Merrifield, R.B., Solid Phase Peptide Synthesis. I. The Synthesis of a Tetrapeptide. Journal of American Chemical Society, 1963. 85(14): p. 2149-2154.
17. Houghten, R.A., General method for the rapid solid-phase synthesis of large numbers of peptides: specificity of antigen-antibody interaction at the level of individual amino acids. Proc Natl Acad Sci U S A, 1985. 82(15): p. 5131-5.
18. Curtidor, H., et al., Plasmodium falciparum rhoptry neck protein 5 peptides bind to human red blood cells and inhibit parasite invasion. Peptides, 2014. 53: p. 210-7.
19. Pal-Bhowmick, I., et al., Generation and characterisation of monoclonal antibodies specific to Plasmodium falciparum enolase. J Vector Borne Dis, 2006. 43(2): p. 43-52.
20. Pinilla B Gladys, Chavarro P Bibiana, Moreno A Natalia, Navarrete O Jeannette, Muñoz M Liliana. Determinación de los genes, 16S ADNr, polA, y TpN47, en la detección de Treponema pallidum subsp. pallidum para el diagnóstico de sífilis congénita. Nova. 2015; 13( 24 ): 17-25.
21. Carrero Sandra Helena Suescún, HerediaMontoya Dina Paola, Bolaños Yoryany Mulato, Medellín Martín Orlando Pulido. Seroprevalencia de infección por Leptospira y factores de riesgo en estudiantes de una universidad de Colombia. Nova. 2017; 15( 27 ): 131-138.
Horario: Lunes a Viernes: 8:00 a.m. a 5:00 p.m
