Perfil de sensibilidad de S. agalactiae obtenido a partir de muestras de introito vaginal y región perineal de mujeres gestantes de Medellín (Colombia)
Clara María Duque1, Beatriz Gómez1, Diana Marcela Sánchez1, Olga Lucia Uribe1
1Grupo de investigación Biociencias, Institución Universitaria Colegio Mayor de Antioquia
Correspondencia: clara.duque@colmayor.edu.co
Recibido:19/09/2011 - Aceptado: 21/10/2011
Palabras clave: S. agalactiae, Perfil de sensibilidad, mecanismo MLSB
To determine the susceptibility profile of S. agalactiae isolated from vaginal cavity and perineal region from pregnant women in Medellín (Colombia) We have carried out a descriptive study to determine the susceptibility profile of S. agalactiae isolates from the vaginal cavity and the perineal region from pregnant women in Medellín, between 2008 and 2010. The S. agalactiae isolates were obtained by first culturing samples in Todd Hewitt broth with antibiotics followed by sub-culturing in agar with Blood 5%. The Kirby-Bauer method described by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) was used to evaluate the antimicrobial susceptibility profile of the isolates. A susceptibility of 100% to ampicillin and vancomycin was observed, that decreased to 25% for tetracycline and 72% for erythromycin and clindamycin.
Key words: S. agalactiae, susceptibility profile, MLSB mechanism.
La transmisión de S. agalactiae (SGA) de las madres colonizadas al recién nacido puede producirse en el útero o por el paso a través del canal del parto (1). En Colombia existen ‘reportes variables de colonización materna que van desde 0% hasta un 25% (2-6). La detección de S. agalactiae en mujeres embarazadas antes del parto es fundamental para prevenir la transmisión vertical y la infección del neonato. La infección por SGA es usualmente tratada con la combinación de penicilina y gentamicina.
Por consenso, las mujeres embarazadas reciben tratamiento profiláctico con penicilina o ampicilina, en el caso de presentar alergia son tratadas con eritromicina o clindamicina. De esta forma, el uso generalizado de estos antibióticos ha favorecido el incremento de la resistencia antibiótica por parte de SGA y por lo tanto una reducción en la eficacia del tratamiento tradicional. Con estos antecedentes se vuelve fundamental la vigilancia de resistencia antimicrobiana al definir los fármacos de elección y las alternativas en la profilaxis (7).
Tipo de estudio, población y muestra
Se realizó estudio descriptivo de corte, en el cual se determino el perfil de sensibilidad de 50 asilamientos de S. agalactiae obtenidos de muestras de introito vaginal y región perineal de 700 mujeres gestantes de la ciudad de Medellín en el periodo 2008-2010, que consultaron en el programa de control prenatal de diferentes IPS de la ciudad. Se invitó a cada gestante a formar parte del estudio y se obtuvo consentimiento informado para participar en el mismo.
El procesamiento de la información se realizo en el programa EPI INFO.
Toma de muestras clínicas, aislamiento e identificación
A todas las participantes del estudio se le tomaron hisopados de introito vaginal y de la región anal.
Las muestras fueron transportadas desde los diferentes establecimientos de salud en el medio Stuart hasta el laboratorio de investigación de la Institución Universitaria Colegio Mayor de Antioquia (IUCMA), donde las muestras fueron sembradas en el caldo ToddHewitt adicionado con ácido Nalidixico y Colistina, en atmósfera de CO2 a una temperatura de 37ºC por 24 horas. Posteriormente, se subcultivó a agar sangre de carnero al 5% en cual se incubó en CO2 por 24 horas, las colonias compatibles con S. agalactiae, se identificaron mediante las siguientes pruebas: coloración de Gram, catalasa (reacción negativa), CAMP (reacción positiva) y aglutinación con partículas de látex, utilizando el kit comercial strepto plus B de la casa comercial Biomereux.
Susceptibilidad antimicrobiana
Se determinó mediante la técnica Kirby Bauer en agar Mueller-Hinton con 5% de sangre de cordero con los siguientes antimicrobianos: ampicilina, clindamicina, eritromicina y tetraciclina, como inoculo se utilizó estándar 0.5 Mc farland, las placas fueron incubadas por 24 h a 35°C ± 2 en 5% CO2. Como cepa control se empleó S. pneumoniae ATCC 49619. Método estandarizado por Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) (8).
Consideraciones éticas
El proyecto contó con la aprobación del Comité de investigaciones de la Institución Universitaria Colegio Mayor de Antioquia, teniendo en cuenta las consideraciones que garantizaron el cumplimiento de los lineamientos éticos del estudio y la obtención del consentimiento informado de los pacientes.
Figura 1. Perfil de sensibilidad a antibióticos de S. agalactiae.
De las 50 cepas estudiadas el 100% fueron sensibles a ampicilina y vancomicina, 25% a tetraciclina, 72% a eritromicina y clindamicina, Figura 1.
Se determinó una resistencia a clindamicina y eritromicina del 28%, los mecanismos observados fueron: MLSB inducible en 2 de los 14 aislamientos (14.2%) y en 12 (85.8%) MLSB constitutivo.
La prevalencia varia de acuerdo a la zona geográfica y la población objeto de estudio, como se observa en los trabajos realizados por diferentes autores donde se reportan cifras que van desde 0% hasta 25% (2-6). Igualmente en estudio realizado por Quiroga en Argentina (9) se sugiere que tanto la incidencia de la colonización como el antibiótico a emplear en la profilaxis intraparto depende del área geográfica y de las características de la población estudiada, además se afirma que la resistencia a la clindamicina y eritromicina es diversa, por lo tanto la profilaxis debería ser guiada por los perfiles de susceptibilidad antibiótica de cada región.
En este estudio se determino un 28% de resistencia a ambos antibióticos (clindamicina y eritromicina). En chile en 100 cepas de S. agalactiae recuperadas de muestras vaginales y de región perineal de mujeres gestantes, 17 (17,1%) fueron resistentes a eritromicina y 13 resistentes a clindamicina (13,1%) (10).
Aún no existen reportes de resistencia a penicilina ni ampicilina, exceptuando el estudio realizado en el hospital Muhimbili de Tanzania en el que se reportó una resistencia de 9,4% a penicilina y 100% de susceptibilidad a ampicilina. (11), al igual que los otros estudios, en este trabajo se reporto sensibilidad del 100% a ambos antibióticos.
Así mismo, en un estudio realizado en Taiwanse reporto resistencia en 26 (1.3%) de los aislamientos a levofloxacin (12), por esta razón es importante realizar seguimiento a los perfiles de sensibilidad a diferentes antibióticos en cada una de las regiones.
Simoes y colaboradores en estudio realizado en Chicago reportaron 100% de sensibilidad a vancomicina, ofloxacina, ampicilina, ciprofloxacina, nitrofurantoina y penicilina; 31% fueron resistentes azitromicina y 19% a clindamicina. (13), datos muy similares a los encontrados en el presente estudio(28%). González, en estudio multicéntrico reporto el 12% de resistencia a eritromicina y 7% a clindamicina (14).
En un estudio realizado por Valdés el antibiograma de las cepas cultivadas mostró 100% de sensibilidad para penicilina, ampicilina y eritromicina y 70,5% para lincomicina (15), en este estudio por el contrario encontramos resistencia a eritromicina del 28%.
En un estudio realizado en Argentina, de 88 aislamientos de S. agalactiaede muestras de orina en los que se realizó la prueba de sensibilidad a los antimicrobianos todosfueron sensibles a ampicilina, vancomicina, cloranfenicol y cefotaxima. Una cepa resultó resistente a eritromicina y otras dos mostraron sensibilidad intermedia a eritromicina y clindamicina respectivamente (16-17).
Todos estos hallazgos incluidos los del presente estudio muestran un incremento en la resistencia a macrólidos en cepas de S. agalactiae demostrando la necesidad de realizar un seguimiento continuo a dichos aislamientos.
El fenotipo eritromicina-clindamicina sensible fue el predominante en el estudio. Sin embargo se encontró una resistencia a clindamicina y eritromicina del 28%, los mecanismos observados fueron: MLSB constitutivo en 85.8% y MLSB inducible en
14.2%.
Como conclusión se determinó que el porcentaje de portadoras de S. agalactiae coincide con lo descrito en otros estudios. El hallazgo frecuente de cepas resistentes a eritromicina y a clindamicina indica que es recomendable la realización de pruebas de sensibilidad en los aislamientos de S. agalactiae en pacientes resistentes a penicilina. Así mismo, se encontró una resistencia a clindamicina y eritromicina del 28%, los mecanismos observados fueron: MLSB constitutivo en 85.8% y MLSB inducible en 14.2%
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